Mansilla de las Mulas fue un importante centro religioso que llegó a contar con seis iglesias en su entorno. De todas ellas tan sólo se conserva ésta, la Iglesia de Santa María.
Tenemos constancia de la existencia de este templo ya en el siglo trece, aunque la construcción actual se corresponde con una edificación posterior del siglo dieciocho.
Ya desde lejos podemos observar sus formas sobrias, levantadas en piedra y adobe. Destaca el campanario sobre el resto del conjunto, con una cubierta a cuatro aguas y bajo ella, los vanos que albergan las campanas. Sobre la primitiva construcción de nave única, se levanta hoy una planta basilical dividida en tres naves y crucero destacado con cúpula sobre pechinas.
Al acceder a su interior, encontramos, presidiendo el altar Mayor, un retablo barroco del siglo dieciocho. Esta pieza ha sido restaurada hace tan solo unos años y en ella se representan en bajorrelieve y en su parte más alta, personajes como Moisés con las tablas, San Pablo y el libro del Nuevo Testamento, San Joaquín y Santa Ana, San José con el Niño y San Juan Bautista con el cordero. En la hornacina central, una Virgen con el Niño en brazos, fechada en el siglo dieciséis dinamiza todo el conjunto y esta flanqueada a su derecha por una imagen de Santa Ana con la Virgen y el Niño, de un estilo del entorno que la relaciona con la escuela de Juan de Juni; y a su izquierda por un San José con Jesús de la mano. Cierran el retablo en su parte más baja, pinturas donde se representan a los Padres de la Iglesia y los Evangelistas.
Este hermoso retablo está coronado por la Virgen de la Asunción, pues esta iglesia fue construida en su honor.